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Recherche de marqueurs précoces de la gestation dans les cellules immunitaires circulantes chez les ruminants.

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Thèse
H

Silva, Laura

École nationale vétérinaire d'Alfort

2012

56 p.

A-2012-129

Gestation ; Méthode de diagnostic ; Diagnostic de gestation ; Étude expérimentale ; Ruminant

Url / Doi : https://theses.vet-alfort.fr/telecharger.php?id=1620

Localisation : Env Alfort (Bibliothèque)

N° de thèse : 129

Bibliographie : 97

Titre anglais : Research of markers of early pregnancy in circulating immune cells in ruminants

En ligne : Oui

Directeur de Thèse : Constant, Fabienne

Assesseur / Examinateur : Grimard-Ballif, Bénédicte

Type de fond : Fonds contemporain

Dans un contexte de productivité qui fait que les exploitations laitières subissent des contraintes économiques importantes, il est crucial de détecter la gestation chez les ruminants au plus tôt, afin que les animaux restent improductifs le moins longtemps possible. L'objectif de cette étude est d'identifier chez la brebis des gènes dont la différence d'expression dans les leucocytes mononucléés circulants (LMC) permette de discerner les animaux gestants des non gestants à 15 jours de gestation (J15). La première partie de ce travail fait la synthèse des données bibliographiques concernant à la fois la mise en place de la gestation chez les femelles de ruminants ainsi que les méthodes de diagnostic usuelles les plus précoces, et les gènes dont l'expression est modifiée lors de gestation dans l'endomètre et les LMC, qu'ils soient stimulés par l'Interféron Tau ou non. Dans la seconde partie, l'auteur a choisi de se focaliser sur cinq gènes dont l'expression était susceptible d'être modifiée par la gestation dans les LMC : CXCL10, PLAC8, STAT-1, FOS et PBEF-1. Cette étude expérimentale a été réalisée sur 32 brebis synchronisées dont une partie a été inséminée et l'autre pas. La gestation a été objectivée à J15 par observation des embryons après lavage des cornes utérines réalisé suite à abattage des animaux. Des prises de sang ont été effectuées sur chaque animal peu avant l'abattage afin d'isoler les LMC. Après extraction des ARNm, le niveau d'expression des gènes a été mesuré par RT-PCR en temps réel pour chaque brebis. Nos résultats confirment que la gestation entraîne une modification de l'expression de certains gènes au niveau des LMC. Les niveaux d'expression à J15 étaient en moyenne significativement différents entre les brebis gestantes et non gestantes pour CXCL10 et STAT-1 (mais pas pour PLAC8, PBEF-1 et FOS). Malgré cela, STAT-1 présentait une grande variabilité des valeurs individuelles. CXCL10 semblait plus intéressant mais il conviendrait de mesurer son expression sur un plus grand nombre d'animaux avant de conclure sur sa fiabilité en tant que marqueur de la gestation à J15 chez la brebis.

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