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La maturation ovocytaire chez la chienne : description et rôle des cellules de la granulosa

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Thèse
H

De La Villeon, Guillaume

École nationale vétérinaire d'Alfort

2007

95 p.

A-2007-099

Maturation ovocytaire ; Ovocyte ; Division cellulaire ; Classification ; Culture in vitro ; Granulosa ; Carnivore ; Chienne

Url / Doi : https://theses.vet-alfort.fr/telecharger.php?id=156

Téléchargeable : Oui

N° de thèse : 099

Bibliographie : 98

Titre anglais : Description and role of granulosa cells in the maturation of the bitch oocyte.

Directeur de Thèse : Chastant, Sylvie

Assesseur / Examinateur : Tiret, Laurent

Type de fond : Fonds contemporain

Au cours de la gamétogenèse chez la femelle, les cellules germinales primordiales qui ont colonisé l'ovaire fœtal s'entourent de cellules folliculaires. Dès lors, ces deux types cellulaires s'organisent en follicule ovarien et coopèrent. Alors que le pic de LH provoque la reprise de méiose ovocytaire dans la majorité des espèces, la maturation ovocytaire ne reprend qu'après l'ovulation chez la Chienne. De plus, il a été suggéré que les critères cytologiques utilisés pour caractériser la reprise de méiose ovocytaire chez la Chienne ne présentaient pas une bonne reproductibilité. Le premier objectif de ce travail était de définir le rôle des cellules de la granulosa dans la reprise de méiose ovocytaire chez la Chienne. Le deuxième objectif était de redéfinir la classification des ovocytes au cours de leur maturation, et de comparer les résultats obtenus avec cette nouvelle classification à ceux obtenus avec la classification de référence. Trois mille quatre cent quarante (3440) ovocytes issus de cinquante-quatre (54) chiennes ont été mis en culture. Huit cent quatre vingt trois (883) ovocytes entourés et quatre cent quarante trois (443) ovocytes dénudés ont été sélectionnés à l'issue de la Maturation In Vitro (MIV). Les stades de maturation ont été déterminés par observation en microscopie confocale en utilisant la classification de référence. Les taux de reprise de la méiose ont été comparés entre les ovocytes dénudés et les ovocytes entourés. Une classification nouvelle a ensuite été proposée à partir des mêmes images confocales, et les conclusions biologiques obtenues avec les deux types de classification ont été comparées. Notre étude établit une proposition de classification permettant de déterminer avec plus de fiabilité et de répétabilité le stade de maturation des ovocytes de chienne. Elle montre, quelle que soit la classification utilisée, que les ovocytes dénudés spontanément ont des taux de dégénérescence, de reprise et d'achèvement de la méiose significativement plus élevés que les ovocytes entourés.

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