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CANINE LEUCOCYTE ADHESION DEFICIENCY : MISE AU POINT D'UN TEST DIAGNOSTIC PAR PCR-RFLP

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Thèse

Picandet, C.

École nationale vétérinaire de Lyon

2002

129 P.

L-2002-153

Carnivore ; Chien ; Race canine ; Setter irlandais ; Technique diagnostique ; PCR ; RFLP ; Immunodéficience canine ; Déficience immunitaire ; Mutation génique ; Test ; Clad

N° de thèse : 153

Bibliographie : 30

Titre anglais : CANINE LEUKOCYTE ADHESION DEFICIENCY : DEVELOPMENT OF A DIAGNOSES TEST USING PCR-RFLP

Type de fond : Fonds contemporain

Le syndrome CLAD est un deficit immunitaire primitif rare mais neanmoins present au sein de la population europeenne de Setters irlandais. Cette maladie est due a une mutation du gene codant pour l'integrine B2, une molecule d'adhesion du leucocyte a la membrane vasculaire. Elle se traduit chez les homozygotes pour l'allele mute par l'inefficacite de la reponse immunitaire et la mort plus ou moins rapide des chiots avant l'age de deux mois. Le deces precoce des animaux atteints, des symptomes peu specifiques ainsi que des examens de laboratoire peu fiables expliquent le faible nombre de cas diagnostiques. La decouverte de la mutation a l'origine de la maladie a rendu possible la mise au point d'un test de detection de l'allele mute, utilisant les techniques de biologie moleculaire de PCR et RFLP. Dans un premier temps et apres avoir extrait l'ADN du prelevement sanguin du chien teste, la PCR permet d'amplifier la sequence du genome contenant le site de mutation. Plusieurs couples d'amorces ont ete essayes : celui permettant d'obtenir les meilleurs resultats (sensibilite, specificite et repetabilite) a ete selectionne. Ensuite, la digestion des amplifiats par certaines enzymes de restriction conduit a l'obtention de fragments de tailles differentes selon que l'allele est normal ou mute. Ce test ADN est simple, fiable et peu couteux : sa realisation systematique pourrait permettre la detection des Setters irlandais porteurs, leur elimination de la reproduction et ainsi l'eradication de la maladie.

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