La spécificité des tests sérologiques pour la paratuberculose bovine est considérée comme élevée. L’objectif de cette étude a été de mieux définir la spécificité des tests sérologiques au sein de trois élevages régulièrement contrôlés et négatifs jusqu’alors pour la paratuberculose, dans lesquels des résultats non-négatifs sont apparus récemment.Suite à l’identification du problème, un dépistage exhaustif a été réalisé l’année suivante au sein de ces troupeaux à l’aide de deux trousses commerciales ELISA (ID.vet et IDEXX), un test interféron-gamma, et la recherche directe de Map avec deux protocoles de PCR quantitative et une coproculture de mélange (n = 10 échantillons). Les résultats des ELISA se sont révélés incohérents au cours du temps et entre les trousses commerciales, suggérant que la réponse sérologique détectée n’est pas spécifique de Map.Les résultats sérologiques non-négatifs au sein de troupeaux supposés indemnes de paratuberculose doivent être interprétés avec prudence, et nécessitent une confirmation par qPCR avec une étape de centri-filtration préalable de l’échantillon de fèces.